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    丁酸鈉對感染柔嫩艾美爾球蟲(E.tenella)肉雞腸道粘膜修復作用的觀察

    文章來源:福建農林大學動物科學學院 作者:王陣峰 更新時間:2020-07-08

       (王陣峰 福建農林大學動物科學學院)FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      一、 試驗目的:研究在肉雞日糧中添加丁酸鈉,觀察丁酸鈉對感染 E.tenella 肉雞的腸道 粘膜的修復作用。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      二、 試驗材料:FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      1.艾維因肉雞:0 日齡時艾維因肉雞購于福州大福有限公司閩侯大福孵化中心,飼養于 用熏蒸消毒法消毒的無球蟲環境中。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      2.柔嫩艾美爾球蟲(E.tenella)強毒株:由華南農業大學寄生蟲實驗室分離純化保存, 孢子化后保存在 5%重鉻酸鉀溶液中,并放在 4℃冰箱中保存。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      3.丁酸鈉(丁壯素 Sodium butyrate):禽類專用 ,新奧(廈門)農牧發展有限公司提供。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      4.飼料:購買于福州天鵬飼料有限公司,有 510 肉用仔雞前期配合飼料(雞花料)和FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      511 肉用仔雞中期配合飼料(肉中雞料)兩種FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      5.治療球蟲藥物:三字球蟲粉(Sulfachl orpyazine Sodium Soluble Powder),即(磺胺氯吡 嗪鈉可溶性粉),購于中瑞合資上海諾華動物保健有限公司。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      三、試驗方法:FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      1.試驗分組:買回來的剛孵化 0 日齡艾維因肉雞在育雛室暫養一周后,隨機分成十二組, 分組時要求挑選身體健康,羽毛豐滿有光澤的小雞,體重相差在±10g,公母各半。并稱量 每只雞體重,按實驗分組情況每只分別口服感染 0.5×104 個和 1.0×104 個 E. tenella 孢子化 卵囊。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      采用平養方式飼養,飼養管理按常規免疫程序。分組情況見表 1 表 1 實驗分組、日糧中添加丁酸鈉、感染 E.tenella 數量FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

    1.jpgFBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      2. 測定指標與方法:FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      肉雞生長性能的測定:在整個實驗過程中,記錄每天各組飼喂的飼料重,每次取材之前 稱量每只雞體重并記錄。計算飼料報酬。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      糞便記分:參照 Morehouse(1970)的標準,在感染球蟲后的第 5、6、7、8、9 天觀察各組 的血便情況,并給各組的血便記分。糞便正常記 0 分;平均每天每組出現多少堆血便就分別 記為多少分。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      盲腸病變記分:參照 Johnson and Reid(1970)標準。病變記分標準按 5 級記分: ①無卵囊, 盲腸正常,記 0;②有卵囊,盲腸黏膜稍增厚, 有少量散在性出血或少量血樣腸內容物, 記 1 分;③有卵囊, 盲腸黏膜增厚, 有明顯的出血或有明顯血樣腸內容物, 記 2 分;④有卵囊, 盲 腸黏膜增厚, 有大量的凝血塊或血樣腸芯, 記 3 分;⑤雞因球蟲病死亡或有大量卵囊, 外觀 盲腸呈醬油色(或小腸中部變粗, 從漿膜面可見許多暗紅色的淤血斑和灰白色點狀壞死灶, 黏膜面呈緋紅色),腸管明顯腫大,內容物形成明顯的血樣腸芯, 記 4 分。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      肉雞死亡率的測定:在整個實驗過程中,每天觀察各組死亡情況,記錄各組的死亡只數, 計算死亡率。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      腸道粘膜變化與腸壁厚度、絨毛長度的測定: 根據雞柔嫩艾美爾球蟲的生活史,于感染 后的第 7 天(14 日齡)的每組各剖檢 5 只,以后每隔 7-10 天每組剖檢 5 只,直到飼養至日FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      齡 52 天左右。采取頸部動脈放血處死,觀察各種器官的變化,特別是腸道的變化,主要是 十二指腸、空腸、回腸、盲腸的病變,分別各取十二指腸、空腸、回腸、盲腸 3-5cm 固定 在濃度為 10%中性福爾馬林溶液中,通過不同濃度的酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋, 作組織切片進一步觀察腸道粘膜的情況。采用 HE 法染色組織切片,在顯微鏡下觀察觀察腸 道(十二指腸、空腸、回腸和盲腸)的病理變化、球蟲感染后的腸道粘膜的變化并拍照,在 光學顯微鏡下觀察并測量腸壁厚度、絨毛長度等。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      三、 結果與分析: 1.丁酸鈉對各組肉雞飼料報酬的影響見表2 FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      表 2 各組肉雞飼料報酬的影響FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

    2.jpgFBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      備注:分組的“丁酸鈉”指第 1、2、3、4 組,“丁酸鈉+抗球蟲藥物”指實驗第 5、6、7、8 組,“感染”指FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      第 9、10 組,“空白”指第 11、12 組。“丁酸鈉 0.1%”指第 1、2 組,“丁酸鈉 0.2%”指第 3、4 組,“丁酸 鈉 0.1%+抗球蟲藥”指第 5、6 組,“丁酸鈉 0.2%+抗球蟲藥”指第 7、8 組。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      雞柔嫩艾美爾球蟲(E. tenella)病主要對腸道粘膜造成損傷,從而影響營養物質的吸收, 飼料轉化率也隨之降低,使得料肉比升高。實驗中使用抗球蟲藥物治療,同時在日糧中添加 0.2%丁酸鈉不加球蟲藥組的料肉比與感染對照組相比低 0.16(P>0.05),添加 0.1%丁酸鈉并 添加抗球蟲藥組比感染對照組、只添加 0.1%丁酸鈉未使用球蟲藥物組分別低 0.14、0.18 FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      (P<0.01),而空白組最低,因此說明丁酸鈉對腸粘膜具有很好的修復作用,促進營養物質 的吸收,從而降低肉雞的料肉比,提高飼料轉化率。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      2.糞便記分情況見表 3FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      表 3 各組糞便記分情況表FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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       3. 肉雞盲腸病變情況見表 4FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      表 4 各組盲腸病變情況表FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

    4.jpg FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在感染E.tenella肉雞的日糧中添加0.1%、0.2%丁酸鈉能減輕盲腸病變,減少血便的排出。 FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      雞柔嫩艾美爾球蟲(E.tenella)病球蟲主要寄生于盲腸及其附近的腸道組織,因此主要病變 也集中在盲腸,盲腸病變記分是對病變嚴重程度的最直接反應。從實驗的結果看,第9、10 組的病變記分最高,這2組的病變相對最嚴重,其他的實驗組因為在日糧中添加有丁酸鈉, 它可以作為腸粘膜上皮細胞的快速能量源,促進腸道細胞的增殖和成熟,維持小腸黏膜上皮 細胞結構完整性, 維持腸道黏膜上皮細胞的正常形態,促進小腸消化吸收功能,維護腸黏膜的 正常的機械屏障作用,對腸粘膜起到快速的修復作用,因此在日糧中添加丁酸鈉能對腸粘膜 起到很好的修復作用,減輕盲腸病變,降低雞群的死亡率。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      5.丁酸鈉對腸絨毛和腸壁厚度的影響見表 6FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

    5.jpgFBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      結果:空白對照組(11、12)的十二指腸腸絨毛長度明顯長于其他組,比感染對照組(9、FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      10)組長 461-492μm(P<0.01),比添加丁酸鈉組(1、2、3、4)長 255-359μm(P<0.01), 比添加丁酸鈉和抗球蟲藥物組(5、6、7、8)長 125-332μm(P<0.05)。十二指腸腸壁厚度 以第 9、10、11、12 組的最厚,明顯比其他組厚?漳c絨毛長度空白對照組(11、12)和另 外其他組差異性不顯著(P>0.05),空腸腸壁空白對照組(11、12)明顯高于感染對照組(9、 10)(P<0.01),其他組同感染對照組(9、10)相比具有顯著差異性(P<0.05)。感染對照組FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      (9、10)回腸腸絨毛長度和腸壁厚度同其他各組具有顯著差異性(P<0.05),第 11 組腸絨FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      毛長度同其他各組具有極顯著差異性(P<0.01)?瞻讓φ战M(11、12)盲腸絨毛與第 1-10 組相比(P<0.01),空白對照組(11、12)間差異性不顯著(P>0.05)。添加丁酸鈉 0.2%和 抗球蟲藥物組(7、8)盲腸腸壁厚度明顯增厚,比感染對照組(9、10)厚 48-60μm(P<0.05)。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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      雞柔嫩艾美爾球蟲(E.tenella)病發病主要集中在感染后的 5-10 天,10 天后雞只不死 亡便可耐過,并迅速恢復。在日糧中添加丁酸鈉的空白對照組的十二指腸、空腸腸絨毛長度 明顯長于其他組,但是感染對照組的長度最短,這也應該是丁酸鈉對促進腸道粘膜上皮細胞 增殖和滋養腸絨毛上皮細胞的原因?瞻捉M、在日糧中添加丁酸鈉并使用抗球蟲藥物組回腸 腸絨毛長度差異不大,但是明顯長于只添加丁酸鈉組的腸絨毛長度,感染對照組的回腸絨毛 長度最短,說明丁酸鈉對腸粘膜有很好的修復作用。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      6. 丁酸鈉對感染 E.tenella 肉雞腸道組織學變化的影響的觀察FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      盲腸是肉雞柔嫩艾美爾球蟲(E. tenella)病主要病變部位。在本實驗中,14 日齡時, 除空白組外,均有不同程度的病變,日糧中只添加丁酸鈉組,在盲腸腸腺及其附近發現大量 球蟲蟲體、裂殖體、球蟲卵囊,寄生部位的腸腺大部分消失,粘膜破壞嚴重,絨毛幾乎全部 脫落,僅存的也是斷裂或殘缺不全。日糧中添加丁酸鈉和使用抗球蟲藥物組,在盲腸腸腺及 其附近發現少量球蟲蟲體、裂殖體、球蟲卵囊,腸絨毛部分脫落或斷裂,腸腺清晰。感染對 照組,整個腸粘膜層幾乎完全脫落,出現固有層裸露現象,在殘存的腸粘膜上皮細胞內和腸 腺內有數量不等的裂殖體侵入,有的腸腺上皮細胞膜破裂,腸腺結構破壞明顯或完全被破壞, 腸腺輪廓消失,被大量的球蟲裂殖體和卵囊所占據,腸腺上皮變性、壞死、脫落,腸腺細胞 內有大量大小不等的、不同發育階段的裂殖體和卵囊。日糧中添加丁酸鈉的空白組,腸絨毛 正常,腸腺發達,數量明顯增多。24 日齡時,十二指腸、空腸、回腸受損部分基本修復完 好,嚴重損壞部分已經被增生的肌肉組織取代。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在實驗中發現,24 日齡時,在日糧中只添加 0.1%丁酸鈉組的盲腸未發現球蟲及其裂殖 體,在日糧中只添加 0.2%丁酸鈉組在腸腺和絨毛上皮均寄生有大量不同發育階段的球蟲及 其裂殖體或卵囊,而且大部分腸腺消失,或殘留的一部分呈空泡狀。這是日糧中添加 0.2% 丁酸鈉對盲腸粘膜的修復作用使病變時間延遲,還是來自環境中的球蟲卵囊再次感染造成 的,值得進一步研究找出為什么感染后 14 天盲腸還有明顯病變。在日糧中添加丁酸鈉和使 用抗球蟲藥物的實驗組,盲腸絨毛相對比較完整,有少部分脫落或斷裂,腺體大部分消失, 腸腺及其附近有大量不同發育階段的球蟲及其裂殖體或卵囊。感染對照組的腸腺及其附近和 絨毛上皮均有大量球蟲蟲體、裂殖體、卵囊,腺體消失,粘膜層破壞嚴重。日糧中添加丁酸 鈉空白組,在腸腺和粘膜上皮亦發現有少量球蟲、裂殖體寄生,腸絨毛很少量脫落或斷裂。 空白組發現球蟲應該是飼養環境飼養人員飼養過程中傳播污染造成的。 FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在 24 日齡時,即感染球蟲后第 14 天,耐過雞應該對球蟲已經產生免疫力,腸粘膜修復 完好,對腸粘膜的損傷消失。為什么在盲腸中發現數量不等的球蟲和裂殖體,究竟是環境二 次感染的結果,還是添加丁酸鈉后對腸粘膜的修復作用,促進小腸肥大細胞增殖,提高小腸 粘膜的免疫水平,使球蟲在寄生部位造成的病變時間推遲呢?值得進一步研究。FBu中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      
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